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    【鴿舍簡介】博主愛鴿如癡，養(yǎng)鴿多年未曾參加過比賽，后因?qū)W業(yè)原因又不得不放棄養(yǎng)鴿�，F(xiàn)為軍事獸醫(yī)研究所在讀研究生。由于專業(yè)的便利外加個人的喜好，接觸了較多的病例也結(jié)識了很多鴿友。

我的畢業(yè)論文

一例賽鴿毛滴蟲病的診治及蟲體的人工培養(yǎng)

    摘要：2013年5月，內(nèi)蒙古通遼市某賽鴿公棚部分賽鴿出現(xiàn)精神沉郁，羽色暗淡無光、排墨綠色稀便、極度消瘦。用消毒棉簽沾取病鴿口腔分泌物，涂于滴有生理鹽水的載玻片上鏡檢，見卵圓形或梨形蟲體，有鞭毛，運動性強(qiáng)。直腸黏膜抹片，革蘭氏染色鏡檢見革蘭氏陰性小桿菌及少量短鏈球菌。麥康凱培養(yǎng)呈黃白色菌落。用消毒棉球沾取病鴿口腔分泌物接種于加有雙抗及血清新鮮的肝湯和雞蛋培養(yǎng)基中，37攝氏度恒溫有氧培養(yǎng)24小時鏡檢可見大量圓形蟲體，繼續(xù)培養(yǎng)48小時后見梨形或卵圓形有明顯鞭毛的成熟蟲體。故初步診斷為鴿毛滴蟲病繼發(fā)感染沙門氏菌。全群給藥甲硝唑，病情逐漸得到控制。

    賽鴿毛滴蟲病又稱口癀或鵝口瘡，是當(dāng)今危害賽鴿及賽鴿運動的主要疾病之一。毛滴蟲：毛綱，多鞭毛目，鴿毛滴蟲是屬鞭毛亞門，動鞭科，屬的禽毛滴蟲（Trichmonas gallinae）。鴿毛滴蟲呈卵圓形或梨形，蟲體前端有毛基體伸出4根鞭毛，可迅速移動，鴿毛滴蟲寄生于各種品種鴿口腔、鼻腔、咽、食道和嗉囊的粘膜等器官，以二分裂的方式進(jìn)行增殖，增值速度快，可感染各年齡的賽鴿、種鴿，對其競翔及育種能力造成極大的影響。蟲體在外界環(huán)境中抗性不強(qiáng)，蟲體對高溫和消毒藥抵抗力也很弱，在4攝氏度冰箱中可存活14～17天，在56℃時2分鐘內(nèi)死亡；常用消毒劑，如4%～6%NaOH、甲酚皂、生石灰等均能很快將其殺死。本病主要經(jīng)口感染。蟲體最常寄生和損害的部位是消化道。

    患鴿的口腔潰瘍灶聚集有大量蟲體，唾液中也有大量的活蟲體。成鴿接吻或“鴿乳”哺育幼鴿時，把蟲體傳遞給伴侶或自己的后代。應(yīng)激因素及其他疾病可成為本病的導(dǎo)火索，幼鴿可從帶蟲的母鴿獲得母源抗體而得到保護(hù)，因此最初幾天能健康地存活。急性型病例，常發(fā)生于6-15日齡的幼鴿，感染后一周左右死亡。幼鴿感染后表現(xiàn)羽毛暗淡無光，消化紊亂，腹瀉和消瘦，食欲減退，飲水增加，口腔分泌物增多，呈黃白色。病鴿呼吸困難。重度感染的幼鴿會很快消瘦，4-9天內(nèi)死亡。通遼市某公棚6000多羽賽鴿均為2013年春季幼鴿。xx多羽賽鴿出現(xiàn)臨床癥狀，死亡八羽。2013年5月28日該公棚送倆羽賽鴿到內(nèi)蒙古民族大學(xué)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)實驗室進(jìn)行診斷。病鴿精神狀態(tài)不良，虹膜及眼砂顏色變淺，羽毛松亂無光，排墨綠色稀便。剖檢變化：口腔黏膜、咽部紅腫充血，部分有白色粘液或干酪樣物；肝臟邊緣出血；脾臟單側(cè)出血；胰腺呈土黃色并有彌散狀出血；腸道輕微鼓氣，法氏囊出血。

    本次實驗從病鴿口腔中分離并在體外利用兩種不同培養(yǎng)基人工培養(yǎng)出一定數(shù)量的毛滴蟲蟲體，并且對病鴿腸道菌群進(jìn)行分離鑒定及藥敏實驗。

    1. 培養(yǎng)基的制備及實驗步驟。

    1.1 試劑材料

    牛肝、NaCl、蛋白胨、半胱氨酸鹽酸鹽、麥芽糖、蒸餾水、雞蛋、氯化鉀、氯化鈣、碳酸氫鈉、葡萄糖、馬血清、青霉素、鏈霉素、瓊脂。

    1.2肝浸湯培養(yǎng)基和LES雙向培養(yǎng)基的制備

    1.2.1肝浸湯培養(yǎng)基的配置：成分：牛肝l5g、氯化鈉0、5g、蛋白胨2g、半胱氨酸鹽酸鹽0、2g、麥芽糖1g及蒸餾水100ml。制法：將牛肝l5g切成小塊，放于100ml蒸餾水中置4℃ 冰箱內(nèi)過夜，次日加熱煮沸1h，過濾取濾液，不足100ml時，用蒸餾水補(bǔ)足；每100ml濾液分別加入上述營養(yǎng)成分；加熱溶解，調(diào)pH值至5.6；分裝試管，每管2 ml，高壓滅菌，放于4℃ 冰箱保存?zhèn)溆�。臨用前加無菌滅活馬血清20％ ，青霉素5000U/ml，鏈霉素5000U/ml。

    1.2.2 LES（Locke-egg-serun）培養(yǎng)基的配置：1.液相制備（Locke液的制備）：氯化鈉4.0g、氯化鉀0.4g、氯化鈣0.2g、碳酸氫鈉0.2g、葡萄糖2.5g，溶于1000ml蒸餾水中。混勻調(diào)pH值到7.0。121攝氏度滅菌20分鐘后置四攝氏度冰箱備用。2.固相制備：全蛋3個、蛋黃1個、瓊脂1g、100ml Locke液混勻調(diào)pH值到7.0。分裝于試管中成30度斜面，置約85攝氏度烤箱加熱2小時凝固制成，置4度冰箱備用。

    1.3 蟲體的采集及接種

    1.3.1蟲體的采集：助手右手握住患鴿腰部攏住兩側(cè)主翼羽及雙腿將其保定好，左手中指與拇指捏住患鴿下喙食指向上揭開其上喙進(jìn)而敞開其口腔。操作者持浸有生理鹽水并于紫外線燈下消毒30鐘的棉簽沾取鴿頰部、上下顎及咽部的分泌物。在酒精燈10cm范圍內(nèi)接種于肝湯或LES培養(yǎng)基中（接種前加入Locke液4ml）。加入20%馬血清及5000U/ml的青霉素和鏈霉素，置37攝氏度恒溫箱中有氧培養(yǎng)24小時后觀察結(jié)果。

    1.4致病菌的分離及藥敏實驗

    1.4.1將病死鴿的心臟、肝臟、肺臟，脾臟及十二指腸分出。無菌操作，接種于血瓊脂培養(yǎng)基中，37攝氏度恒溫厭氧培養(yǎng)二十四小時。

    1.4.2 將培養(yǎng)出的菌落接種于麥康凱培養(yǎng)基，并做藥敏實驗。37攝氏度培養(yǎng)24小時后觀察結(jié)果。

    2.結(jié)果

    1.1毛滴蟲的人工培養(yǎng)結(jié)果。

    2.1.1培養(yǎng)24小時后。肝浸湯培養(yǎng)基：試管底部出現(xiàn)白色絮狀沉淀，輕輕搖起沉淀并用移液槍吸取液柱下1/3處培養(yǎng)基50微升滴于載玻片上并蓋上蓋玻片。400倍鏡下觀察有大量圓形蟲體，未見鞭毛，可輕微震動。

    LES培養(yǎng)基：同上步所示，鏡下觀察同樣有一定數(shù)量的圓形蟲體，未見鞭毛，并且可以震動。

    2.1.1培養(yǎng)48小時后。肝浸湯培養(yǎng)基：試管內(nèi)沉淀量增多。經(jīng)過鏡檢，發(fā)現(xiàn)蟲體普遍增大，運動性曾強(qiáng)，且有部分蟲體有明顯鞭毛。

    LES培養(yǎng)基：結(jié)果同上但蟲體數(shù)目較肝浸湯培養(yǎng)基少。

    3.討論

    伴隨著我國經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平的提高和人民生活水平的改善，一些舶來的、非廣泛的運動及娛樂項目運動項目越來越受國人的青睞。賽鴿運動作為其中之一，在我國早已有了廣泛的群眾基礎(chǔ)。疾病是影響該運動開展的一大障礙，毛滴蟲病則又是鴿病中最常見、危害最重的疾病之一。

    毛滴蟲攜帶鴿占鴿群的相當(dāng)一部分，正常情況下并不發(fā)病，只有在感染其他疾病或應(yīng)激反映導(dǎo)致抵抗力降低而引起發(fā)病。而作為一羽賽鴿，特別是參加公棚賽的賽鴿，從破殼而出后不久就要就要接受各種疫苗的接種，緊接著就是長途運輸，還要和來自不同地區(qū)不同品系的同伴共處一室。這些應(yīng)激和交叉感染是一羽賽鴿必須接受且不能逃避的。所以從根本上研究毛滴蟲的生理特性和治病機(jī)理是必要的，人工增值培養(yǎng)是獲得大量高純度蟲體的有效途徑。

    本次實驗的培養(yǎng)基配方原本用于培養(yǎng)人口腔毛滴蟲及陰道毛滴蟲，卻成功培養(yǎng)出了鴿毛滴蟲。那么人源毛滴蟲的研究方法或進(jìn)展是否值得借鑒，或者反之，值得思考。甲硝唑作為治療毛滴蟲病的首選藥物被廣泛應(yīng)用，隨之而來的是抗藥性的產(chǎn)生。我們可以通過毛滴蟲體外藥敏實驗來研制開發(fā)新的有效藥物，蟲體的體外培養(yǎng)技術(shù)則是藥敏實驗的先決條件。

    作為信鴿愛好者及公棚管理者，想要賽鴿取得好賽績、比賽順利進(jìn)行，就要在日常的飼養(yǎng)管理中多下功夫，增強(qiáng)賽鴿體質(zhì)，減少不必要的應(yīng)激。